notizie sull'azienda Non comprare quello sbagliato, i tamponi PIPES e HEPES sono molto diversi

In esperimenti biochimici e coltura cellulare, la scelta del tampone appropriato è uno dei passaggi chiave per garantire l'accuratezza e la stabilità dell'esperimento.L'acido N'-bis (((2-etanosulfonico)) e l'acido HEPES (4- ((2-idrossietil)-1-piperazineetanosulfonico) sono due tamponi comunemente utilizzatiSebbene tutti svolgano un ruolo importante nell'adeguamento del pH delle soluzioni, le loro proprietà, gli scenari di applicazione e le precauzioni sono molto diversi.Di seguito è riportata un'analisi dettagliata delle differenze significative tra PIPES e HEPES per aiutare i ricercatori scientifici e i tecnici di laboratorio a selezionare e utilizzare correttamente questi due tamponi..

一- Proprietà chimiche e solubilità di PIPES e HEPES
 

1. HEPES
 

(1) Proprietà chimiche: l'HEPES è un tampone zwitterionico contenente gruppi di aminoacidi e acidi sulfonici nella sua struttura molecolare,che gli consente di tamponare le variazioni della concentrazione di ioni di idrogeno in un ampio intervallo di pH (6.8-8.2) e mantenere stabile il pH della soluzione.
 

(2) Solubilità: L'HEPES è altamente solubile in acqua, il che gli consente di essere facilmente utilizzato in una varietà di sistemi sperimentali biochimici senza la necessità di ulteriori fasi di dissoluzione.

2. PIPE
 

(1) Proprietà chimiche: il PIPES è anche un tampone ideale con un intervallo di pH leggermente più ristretto rispetto al HEPES, a 6,1-7.5L' anello di piperazina e i gruppi di acido sulfonico nella sua struttura molecolare gli conferiscono la capacità di tamponare il pH in condizioni specifiche.
 

(2) Solubilità: a differenza di HEPES, il PIPES è insolubile in acqua, ma solubile in NaOH.e le sue proprietà di solubilità devono essere prese in considerazione negli esperimenti reali.

2- Scenari di applicazione e differenze funzionali tra PIPES e HEPES
 

1Applicazione dell'HEPES
 

(1) Coltura cellulare: l'HEPES è ampiamente utilizzato nei mezzi di coltura cellulare di vari tipi di organismi perché non è tossico per le cellule e non interferisce con le normali reazioni biochimiche,specialmente nei sistemi sperimentali che richiedono un lungo periodo di tempo per mantenere un valore di pH stabile.
 

(2) Ricerca sulle proteine e sugli enzimi: nella ricerca sulla stabilità delle proteine, l'HEPES è spesso utilizzato come tampone perché può mantenere costante il pH della soluzione per lungo tempo,che è utile per il mantenimento della struttura e della funzione proteicaAllo stesso tempo, viene utilizzato anche nella ricerca di proteine ed enzimi altamente volatili e sensibili al pH.
 

(3) Biologia molecolare: nell'estrazione del DNA/RNA, nei kit di diagnostica PCR e nei kit di diagnostica biochimica, l'HEPES è un componente tampone importante per garantire la stabilità del pH durante l'esperimento.
 

2Applicazione dei tubi
 

(1) Purificazione delle proteine: il PIPES ha applicazioni particolari nel campo della purificazione delle proteine,come la purificazione della tubulina mediante cromatografia a fosfocellulosa e la purificazione delle proteine ricombinanti che legano il GTP ARF1 e ARF2 mediante filtrazione in gelLa sua caratteristica di non formare complessi stabili con la maggior parte degli ioni metallici la rende adatta a funzionare bene nei sistemi di soluzione contenenti ioni metallici.
 

(2) Analisi cromatografica: nella cromatografia a scambio cationale, il PIPES è spesso utilizzato come componente di tampone di legame o di eluente,ma la sua concentrazione deve essere rigorosamente controllata per evitare errori sperimentali causati da una forza ionica eccessiva o da variazioni del valore di pKa.
 

(3) Esperimenti biochimici specifici: sebbene la gamma di applicazioni di PIPES sia relativamente ristretta, svolge un ruolo insostituibile come tampone in alcuni esperimenti specifici,come il fosfato di calcio e il sistema di precipitazione del DNA, AFM ed esperimenti di elettroporazione.

III. Precauzioni per l'uso dei tamponi PIPES e HEPES
 

1. Precauzioni per l' HEPES
 

(1) Interferenza: sebbene l'HEPES non interferisca con i processi biochimici nella maggior parte dei casi, interferisce con la reazione tra il DNA e gli enzimi di restrizione,quindi non è adatto per esperimenti che richiedono un controllo preciso del taglio dell'enzima del DNAAllo stesso tempo, il metodo di Lowry non è adatto per determinare il tenore di proteine, il che può influenzare l'accuratezza dei risultati di determinazione.
 

(2) Selezione della concentrazione: quando si utilizza HEPES, la concentrazione appropriata deve essere selezionata in base ai requisiti sperimentali.il mezzo di coltura contiene spesso 20 mmol/L di HEPES per ottenere una capacità di tamponamento sufficiente.
 

2. Precauzioni per le PIPE
 

(1) Solubilità: prima di utilizzare PIPES, assicurarsi che sia completamente sciolto nella soluzione acquosa di NaOH per evitare interferenze di particelle non sciolte nell'esperimento.
 

(2) Formazione di radicali liberi: PIPES può formare radicali liberi, quindi non è adatto per l'uso in esperimenti che devono evitare reazioni redox.
 

(3) Dipendenza dalla concentrazione: il valore pKa di PIPES dipende dalla concentrazione e la sua forza ionica è relativamente elevata.occorre prestare particolare attenzione alla selezione e al controllo della concentrazione.