CAS 7240-90-6 5-bromo-4-cloro-3-indolil-beta-D-galattoside X-GAL

Il 5-Bromo-4-cloro-3-indolil-beta-D-galattoside (X-Gal) è un substrato comunemente utilizzato in biologia molecolare e biochimica per rilevare l' attività dell' enzima β-galattosidasi.È ampiamente usato in analisi che coinvolgono l'analisi dell'espressione genica e della localizzazione delle proteine.

Ecco alcuni punti chiave su X-Gal:

1. Principio: X-Gal è un substrato incolore che, in presenza di β-galattosidasi, viene idrolizzato per ottenere un prodotto blu.Questa reazione enzimatica consente di rilevare l' attività della β-galattosidasi nelle cellule o nei tessuti.

2. Applicazione: X-Gal è spesso usato in combinazione con il gene lacZ, che codifica la β-galattosidasi.attività di promozioneLa colorazione X-Gal può rivelare la presenza e l'attività della β-galattosidasi, indicando l'espressione del gene lacZ.

3. Sviluppo del colore: quando l'X-Gal viene idrolizzato dalla β-galattosidasi, si ottiene un prodotto blu chiamato 5,5'-dibromo-4,4'-dicloroindigo.Questo colore blu è visivamente rilevabile e consente un'analisi qualitativa dell'attività della β-galattosidasi.

4. Specificità del substrato: X-Gal è specificamente scisso dalla β-galattosidasi e non è idrolizzato dalla maggior parte degli altri enzimi comuni,rendendolo un substrato specifico e affidabile per la rilevazione dell'attività della β-galattosidasi.

5. Manipolazione e stoccaggio: X-Gal è in genere disponibile come polvere che può essere sciolta in un solvente adatto, come la dimetilformamide (DMF) o il dimetil sulfosforo (DMSO), per preparare una soluzione di base.Deve essere conservato a -20°C in un ambiente asciutto e buio per mantenere la sua stabilità.

6. Precauzioni di sicurezza: come per qualsiasi reagente chimico, è importante seguire i protocolli di sicurezza appropriati quando si manipola X-Gal.e lavorare in una zona ben ventilata.

L'X-Gal è stato ampiamente utilizzato in vari campi di ricerca, tra cui la biologia molecolare, la genetica e la biologia dello sviluppo, come prezioso strumento per visualizzare e studiare i modelli di espressione genica.